人S100A8重组腺病毒质粒的构建及鉴定
目的 构建人S100A8(hS100A8)重组腺病毒质粒,为hS100A8的深入研究奠定基础.方法 从pGST-hS100A8中扩增hS100A8片段,亚克隆至穿梭质粒pAdTrack-TOX,构建重组穿梭质粒pAdTrack-TOX-hS100A8.经酶切、PCR及测序鉴定,再经Pme I酶切线性化后电转化感受态AdEasier细胞,获得重组腺病毒质粒pAdhS100A8,经Pac I酶切后转染至HEK293细胞进行包装,制备重组腺病毒,扩增后进行病毒滴度测定及RT-PCR和Western blot鉴定.结果 重组穿梭质粒pAdTrack-TOX-hS100A8及腺病毒质粒pAdhS100A8经鉴定均构建正确;重组腺病毒AdhS100A8在HEK293中成功包装,扩增后病毒滴度为1011IU/ml;hS100A8在HEK293细胞中成功表达.结论 成功构建了hS100A8重组腺病毒质粒,为深入研究hSl00A8奠定了基础.
S100A8蛋白质类、重组腺病毒
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Q784(基因工程（遗传工程）)
国家自然科学基金30772548
2011-06-23（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
259-262
