RV-G/LTB双基因融合真核表达质粒的构建及其在Vero细胞中的表达

摘要：

目的 构建RV-G/LTB双基因融合真核表达质粒,并在Vero细胞中表达.方法 应用重叠延伸PCR方法,采用一定的linker序列(Gly4Ser)2将已克隆的狂犬病病毒糖蛋白(Rabies virus glycoprotein,RV-G)基因片段和大肠杆菌不耐热肠毒素B亚单位(E.coli heat-labile enterotoxin subunit B,LTB)基因片段进行融合,扩增融合基因Clinker-LTB,并插入真核表达质粒pVAX1中,构建重组真核表达质粒pVAX1-G-linker-LTB,转染Vero细胞,间接免疫荧光试验和Western blot法检测融合蛋白的表达.结果 重组真核表达质粒pVAXI-G-linker-LTB经双酶切及测序鉴定证明构建正确,转染Vero细胞后,可检测到融合蛋白的表达.结论 已成功构建了RV-G/LTB双基因融合真核表达质粒,并在Vero细胞中表达了融合蛋白.

关键词：狂犬病病毒、糖蛋白类、大肠杆菌不耐热肠毒素B、融合基因、Vero细胞

所属期刊栏目：24

分类号：Q78(基因工程（遗传工程）)

在线出版日期：2011-06-23（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：255-258