曲妥珠单克隆抗体生物学活性检测方法的建立及比较

摘要：

目的 建立4种检测曲妥珠单克隆抗体Trastuzumab生物学活性的方法,并进行比较.方法 利用表面等离子共振技术(Sufface plasmob resonance,SPR)建立Trastuzumab的BIAeore分析方法,同时建立抗体对人乳腺癌SKBR3细胞增殖抑制活性的检测方法、基于SKBR3细胞的抗体结合特性检测方法及抗体与ErbB2抗原结合活性的ELISA检测方法,验证各方法的重复性,并对不同检测方法进行比较.结果 BIAcore法的偶联最佳pH值为5.0,样品浓度为0.05～5.00 nmol/L,动力学常数(KD)为0.19 nmol/L;Trastuzumab体外抑制SKBR3细胞增殖的半数有效浓度(EC50)为0.145μg/ml(R2>0.98);基于SKBR3细胞的抗体结合特性的EC50值为0.124μg/ml(R2>0.98);Trastuzumab抗体与ErbB2抗原结合活性的EC50值为0.143 μg/ml(R2>0.98);4种检测方法重复性较好,检测结果基本一致.结论4种检测方法均能有效地反映Trastuzumab的生物学活性,为快速、简便地筛选曲妥珠单克隆抗体提供了多种检测方法.

关键词：曲妥珠、抗体、单克隆、BIAcore、生物学活性、酶联免疫吸附测定

所属期刊栏目：24

分类号：R392-33

在线出版日期：2011-04-28（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：216-220