一种新型杂合抗菌肽在毕赤酵母中的表达及其抗菌活性
目的 在毕赤酵母中表达杂合抗菌肽CA(1-11)CD(12-37)ME(1-18)(ADM),并检测其抗菌活性.方法 根据毕赤酵母(Pichia pastoris)偏爱密码子,合成杂合抗菌肽CA(1-11)CD(12-37)ME(1-18)基因,插入pPIC9K载体,构建重组表达质粒pPIC9K-ADM,电转化至毕赤酵母GS115,筛选阳性菌株,甲醇诱导表达,Tricine-SDS-PAGE检测ADM蛋白的表达,并对其抗菌活性进行初步检测.结果 重组表达质粒pPIC9K-ADM经双酶切和测序鉴定证明构建正确;阳性酵母转化子的PCR产物可见目的基因条带;杂合抗菌肽在毕赤酵母GS115中获得分泌表达,可溶性蛋白约占菌体总蛋白的13%;且对E coli DH5α、E.Coli JM109和金黄葡萄球菌具有一定的抗菌活性.结论已在毕赤酵母GS115中表达了具有一定抗菌活性的杂合抗菌肽ADM,为相关新药的研究奠定了基础.
杂合子、抗菌肽、毕赤酵母、基因表达、抗菌活性
24
R978.1;Q789(药品)
辽宁省教育厅资助2008427
2011-04-28(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
173-175,178