稳定表达BCR/ABL-T315I的小鼠BP210-T315I细胞株的建立

摘要：

目的 构建能稳定表达T315I的BCR/ABL的小鼠BP210-T3151细胞株,并观察该细胞株对酪氨酸激酶抑制剂STI571的敏感性.方法 采用PCR法将重组逆转录病毒载体MIGR-P210中的abl基因第944位碱基C定点突变为T,再将该位点突变成功的逆转录病毒载体转染到包装细胞内,收集病毒,感染BaF3细胞,经筛选和亚克隆获得稳定表达T315I的BCR/ABL蛋白的小鼠BP210-T3151细胞.采用RT-PCR、DNA测序和Western blot鉴定abl基因第944位碱基是否发生突变;MTT法检测BP210-T315I细胞对STI571的耐药性.结果 T315I的bcr/abl基因已整合到BaF3细胞基因组中,B210-T315I细胞能稳定表达T315I的bcr/abl基因与蛋白;与BaF3-P210细胞株相比,经STI571处理后,BP210-T315I细胞对STI571明显耐药,其耐药倍数约为100.结论已成功构建稳定表达小鼠T315I的转化细胞株,该细胞株具有对STI571耐药的恶性表型特征.

关键词：白血病、粒-单核细胞、慢性、融合蛋白质类、bcr-abl、突变、耐药

所属期刊栏目：24

分类号：Q279;Q789(细胞生物物理学)

资助基金：国家自然科学基金30871102

在线出版日期：2011-04-28（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：149-152