NIRF蛋白的原核表达及纯化
目的 原核表达NIRF基因,并纯化NIRF蛋白.方法 PCR扩增全长NIRF基因,克隆入原核表达质粒pGEX-4T-1中,转化E. coli BL21(DE3),IPTG诱导表达,并用GST 4B球珠亲和纯化目的 蛋白.结果 重组表达质粒pGST-NIRF经酶切鉴定证明构建正确.22℃条件下培养,菌体A600值达1.8时,加入终浓度为0.5 mmol/L的IPTG诱导7 h,能使GST-NIRF在上清中大量表达;纯化的重组GST-NIRF蛋白纯度达85%以上,可与GST抗体和NIRF抗体发生特异性结合.结论 已成功在大肠杆菌中表达了GST-NIRF蛋白,纯化的蛋白可用于NIRF的生物功能活性研究.
NIRF、GST标签、原核细胞、基因表达、纯化
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Q78(基因工程（遗传工程）)
国家自然科学基金资助项目30872248;重庆市科技委员会资助CSTC;2008BB5400;重庆市教育委员会资助KJ080326
2011-04-12（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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