JTV1基因真核表达质粒的构建及其在K562细胞中的表达
目的 构建JTV1基因真核表达质粒并稳定转染人白血病细胞系K562,检测转染细胞中JTV1基因mRNA和蛋白的表达水平及其对K562细胞增殖的影响.方法 从人外周血单个核细胞中克隆JTV1基因,并将其插入pcDNA3.1表达载体中,构建真核重组表达质粒pcDNA3.1-JTV1,经脂质体介导转染K562细胞,采用RT-PCR和Western blot法鉴定转染细胞中JTV1基因mRNA和蛋白的表达水平;MTT法检测JTV1稳定表达对K562细胞增殖的影响.结果 重组表达质粒pcDNA3.1-JTV1经双酶切及测序证实,目的 基因已插入质粒中;人JTV1基因能在K562细胞中稳定表达;JTV1具有抑制K562细胞增殖的作用.结论 已成功构建了JTV1基因真核表达质粒,并获得了稳定表达人JTV1基因的K562细胞克隆,为进一步研究人JTV1基因的功能及其与白血病细胞增殖及凋亡的相关性提供了细胞模型.
JTV1基因、真核细胞、基因表达、K562细胞、细胞增殖
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Q782(基因工程（遗传工程）)
国家自然科学基金30300449;国家中医药管理局资助02-03ZP52;重庆医科大学课题XBYB2007104
2011-04-12（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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