重组肺癌抑癌基因1蛋白的表达、纯化及其多克隆抗体的制备

摘要：

目的 表达、纯化重组人肺癌抑癌基因1(Tumor suppressor in lung cancer 1,TSLC1)蛋白,并制备其多克隆抗体.方法 采用RT-PCR法扩增TSLC1基因全长编码区序列,克隆入原核表达质粒pQE30,转化大肠杆菌M15,IPTG诱导表达,表达的重组蛋白经Ni2+-NTA亲和层析纯化后,免疫家兔,Protein A亲和层析纯化抗血清,并经Western blot分析其反应原性.结果 重组表达质粒pQE30-TSLC1经双酶切及测序鉴定证明构建正确.重组TSLC1蛋白的表达量约占菌体总蛋白的14%,主要以包涵体形式存在.纯化的重组蛋白纯度为93.4%,可与小鼠抗His-Tag单克隆抗体发生特异性反应.以其制备的多克隆抗体具有良好的抗原识别特异性.结论 已成功制备TSLC1多克隆抗体,为深入研究TSLC1分子的生物学活性奠定了基础.

关键词：肺癌抑癌基因1、原核细胞、基因表达、纯化、抗体

所属期刊栏目：23

分类号：Q78;R734.2(基因工程（遗传工程）)

在线出版日期：2011-03-24（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：1329-1332