高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒Nsp2缺失变异株与经典美洲型毒株基因芯片鉴别方法的建立

摘要：

目的 建立高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒(Porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)Nsp2缺失变异株与经典美洲型毒株基因芯片鉴别方法.方法 根据高致病性PRRSV Nsp2缺失变异株与经典美洲型毒株(非缺失株)的核苷酸序列,设计扩增美洲型PRRSV保守序列和包含基因缺失区域的Nsp2基因片段的二重PCR引物,并设计长度为31～35 nt的美洲型毒株通用寡核苷酸探针和非缺失株相对于变异株Nsp2基因缺失区域的探针,建立寡核苷酸芯片方法.检测该方法的特异性和灵敏度,并进行初步应用.结果 通过杂交模式可清楚地区分经典毒株与缺失毒株;芯片探针与猪瘟病毒(Classical swine fever virus,CSFV)、猪圆环病毒2型(Porcine circovirus type 2,PCV2)、猪伪狂犬病病毒(Pseudorabies virus,PRV)样品无非特异性杂交;芯片法与常规PCR法的灵敏度相近;对12份疑似高致病性PRRS猪病料的检测结果与常规PCR法一致.结论 建立的芯片方法能够准确鉴别高致病性PRRSV Nsp2缺失变异株,可用于高致病性PRRSV的临床诊断和流行病学调查.

关键词：高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒、经典美洲型猪繁殖与呼吸综合征病毒、Nsp2缺失变异株、寡核苷酸芯片、诊断、鉴别

所属期刊栏目：23

分类号：Q789(基因工程（遗传工程）)

在线出版日期：2011-01-13（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：1254-1259