多聚赖氨酸为载体的聚合物标记物在丙型肝炎病毒核心抗原检测中的应用
目的 探讨以多聚赖氨酸为载体的聚合物标记物在丙型肝炎病毒(Hepatitis C virus,HCV)核心抗原检测中的应用.方法 以多聚赖氨酸作为载体,将HCV核心抗原单克隆抗体与辣根过氧化物酶(HRP)偶联形成聚合物标记物,同时制备过碘酸钠标记物,比较两种标记物中的抗体相对含量及抗体反应性;将两种标记物分别应用于ELISA和Western blot法检测HCV核心抗原中,比较二者的检测结果,并与市售试剂盒进行比较.结果 通过竞争抑制和直接结合试验结果显示,当达到50%抑制率时,聚合物标记物和过碘酸钠标记物的游离抗体浓度分别为0.0019和0.0011 mg/ml;当A403值为1.0时,聚合物标记物的稀释度为1:200000左右,而传统标记物为1:20000左右.聚合物标记物和过碘酸钠标记物应用于ELISA法,检测HCV核心抗原的最低检测限分别为2.0和10 pg/ml,试验内、试验间变异系数均<10%,特异性良好,临床血清标本检测结果与市售试剂盒的符合率分别为97.0%和98.6%;在Western blot检测中,与过碘酸钠标记物相比,聚合物标记物至少可以提高检测灵敏度10倍.结论 以多聚赖氨酸为载体的聚合物标记物可应用于HCV核心抗原的ELISA和Western blot检测,且能提高酶、抗体的比例,进而提高检测的灵敏度,防止漏检.
多聚赖氨酸、载体、聚合物、标记物、丙型肝炎病毒、核心抗原
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R373.2;R392-33(医学微生物学(病原细菌学、病原微生物学))
广东省科技计划项目2008A030201025;深圳市科技计划项目200712;深圳大学青年基金200835
2011-01-13(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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