人表皮蛋白质组双向电泳的建立及技术的改进

摘要：

目的 建立人表皮蛋白质组双向电泳(Two-dimensional electrophoresis,2-DE)图谱,并改进技术条件,为人表皮蛋白质组学的研究提供技术参考.方法 以2种不同的方法提取人表皮总蛋白,使用固相pH梯度胶条进行2-DE,并对样品上样量、等电聚焦(Isoelectric focusing,IEF)参数及硝酸银染色等关键步骤进行改进.采用PDQuest8.0软件分析比较2-DE图谱.结果 采用液氮研磨后再裂解的方法制备的人表皮总蛋白,以250 μg上样,以改进的IEF参数和硝酸银染色步骤获得的2-DE图谱清晰、分辨率高、重复性好,匹配率为85.5%.分离出蛋白质点551±31个,均匀分布在相对分子质量14000～100000、pH 5～8之间,比常规方法所获得的2-DE图谱蛋白点明显增多(P<0.05).结论 已建立了人表皮蛋白质组2-DE图谱,改进的方法比常规方法更适用于人表皮蛋白质组学的研究.

关键词：表皮、双向电泳、蛋白质组学

所属期刊栏目：23

分类号：Q51;R392-33(蛋白质)

资助基金：中华医学会-欧莱雅中国人健康皮肤研究项目S2008050627

在线出版日期：2010-12-16（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：1129-1131,1137