快速检测淋球菌porA和16S rRNA基因的环介导等温扩增技术的建立
目的 建立快速检测淋球菌porA和16S rRNA基因的环介导等温扩增(Loop-mediated isothermal amplification,LAMP)技术,探讨其用于淋球菌感染早期诊断的可行性.方法 利用Primer-Explorer V3软件分别针对淋球菌porA及16S rRNA基因设计6条引物(2条内引物FIP、BIP,2条外引物F3、B3,2条环引物LF、LB),以淋球菌标准菌株基因组DNA为模板,进行LAMP扩增,同时,以外引物F3、B3为PCR引物,进行PCR扩增,并比较2种扩增方法的灵敏度和特异性.结果 LAMP法与PCR法灵敏度相同,可检测到10个拷贝的目的基因;其针对淋球菌porA和16S rRNA基因的引物对脑膜炎奈瑟菌、肺炎链球菌和大肠埃希菌的DNA均不能扩增.结论 已成功建立了检测淋球菌porA和16S rRNA基因的LAMP技术,为淋球菌的快速检测提供了新的手段,有望成为淋球菌常规检测的简便方法.
淋球菌、porA 基因、16S rRNA基因、环介导等温扩增技术、聚合酶链反应
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R378.1+6;R446.5(医学微生物学(病原细菌学、病原微生物学))
国家自然科学基金资助项目30700914
2010-12-16(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
1125-1128