重组人角质化细胞生长因子-2发酵条件的优化及其活性

摘要：

目的 优化重组人角质化细胞生长因子-2(Recombinant human keratinocyte growth factor-2,rhKGF-2)基因工程菌的发酵条件,并对rhKGF-2进行纯化及活性检测.方法 优化rhKGF-2基因工程菌接种量、装液量、培养基初始pH值、IPTG浓度、诱导时机和诱导时间等发酵条件;rhKGF-2经离子交换层析和肝素亲和层析后,采用MTT法检测其对NIH-3T3细胞增殖的影响.结果 rhKGF-2基因工程菌的最佳发酵条件为:接种量2.0%,装液量50 ml/250 ml三角瓶,培养基初始pH值6.5～7.0,IPTG浓度0.10 mmol/L,菌体处于对数生长初期时(A600=0.8～1.0)开始诱导,诱导时间4 h;纯化的rhKGF-2经HPLC检测纯度达95.0%以上;在1～100 μg/ml浓度范围内,rhKGF-2对NIH-3T3细胞的增殖具有促进作用.结论 优化了rhKGF-2基因工程菌的发酵条件,获得了纯度较高、具有活性的rhKGF-2蛋白,为其工业化生产奠定了基础.

关键词：角质化细胞生长因子-2、发酵、纯化、活性

所属期刊栏目：23

分类号：Q78(基因工程（遗传工程）)

资助基金：长春市应用技术计划研究技术项目08YZ45;科技型中小企业技术创新基金项目09C26212203306

在线出版日期：2010-12-16（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：1090-1094