人源化叶酸受体α抗体质控方法的建立

摘要：

目的 建立人源化叶酸受体α抗体的质控方法.方法 应用基于表面等离子体共振(Surface plasmon resonance,SPR)技术的BIAcore 3000系统测定人源化叶酸受体α单抗与重组人叶酸受体α的亲和力,从而反映该抗体的功能;采用ELISA法测定其抗原结合力;SDS-PAGE和SEC-HPLC测定其纯度;紫外分光光度法测定其蛋白含量;毛细管等电聚焦电泳法测定等电点;其他各项指标检测按<中国药典>三部(2005版)要求进行.结果 人源化叶酸受体α单抗成品的平均相对百分效价为105%,RSD为6.0%.单抗成品及参考品与叶酸受体的结合力均存在量效关系,且符合四参数方程式:Y=(A-D)/[1+(X/C)B]+D,其曲线相关系数在0.98以上,成品经3次测定,相对抗原结合力平均值为97%,RSD为25%.还原SDS-PAGE分析显示,单抗成品的IgG重链和轻链百分比为98.2%;非还原SDS-PAGE分析显示,完整IgG百分比为96.7%;SEC-HPLC分析显示,单抗成品单体为99.1%,聚合体为0.9%.其他各项指标均符合<中国药典>三部(2005版)要求.结论 已初步建立了人源化叶酸受体α抗体的质控方法,为该制品的质量控制奠定了基础.

关键词：重组人叶酸受体α、人源化抗体、质量控制

所属期刊栏目：23

分类号：Q789(基因工程（遗传工程）)

资助基金：国家高技术研究发展计划863计划项目2007AA021204

在线出版日期：2010-11-30（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：986-989