弓形虫亲环蛋白基因的克隆及原核表达
目的 克隆并原核表达刚地弓形虫(Toxoplasma gondii)亲环蛋白(Cyclophilin,CyP)基因.方法 收集、纯化Rh株弓形虫速殖子,提取总RNA,应用RT-PCR技术扩增TgCyP基因,插入原核表达载体pET-28a中,构建重组表达质粒pET-28a-TgCyP,转化E.coli BL21(DE3),经IPTG诱导后.进行SDS-PAGE和Western blot分析.结果 测序结果与GenBank中登录的基因序列同源性为100%,重组表达质粒pET-28a-TgCyP经PCR及双酶切鉴定证明构建正确.SDS-PAGE分析表明,重组蛋白的相对分子质量约为26 000,表达量约占菌体总蛋白的40%,Western blot显示其能被鼠抗弓形虫免疫血清识别.结论 已在E.coli BL21(DE3)中表达了Rh株TgCyP,其有望作为弓形虫疫苗的候选抗原.
刚地弓形虫、亲环蛋白、克隆、分子、原核细胞、基因表达
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R382.5(医学寄生虫学)
国家科技支撑计划项目2008BAD96B11-3
2010-11-30（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
961-963,966
