胆盐水解酶基因在毕赤酵母中的表达
目的 在毕赤酵母中表达胆盐水解酶(Bile salt hydrolase,BSH)基因.方法 以重组质粒pMD18-BSH为模板,PCR扩增BSH基因,克隆至毕赤酵母表达载体pGAPZαA上,经AvrⅡ线性化,电转化至毕赤酵母SMD1168,PCR筛选阳性重组子,诱导表达,表达产物经Western blot进行分析.结果 重组表达质粒pGAPZαA-BSH经双酶切及测序证明构建正确;经PCR鉴定阳性的重组酵母菌的诱导表达产物经SDS-PAGE分析.可见相对分子质量约35 000的目的 蛋白表达条带;表达的重组蛋白可与兔抗植物乳杆菌多克隆抗体发生特异性反应.结论 在毕赤酵母中成功表达了BSH,为BSH结构与相关功能及高效降解胆固醇的基因工程菌株的研究奠定了基础.
胆盐水解酶、毕赤酵母、基因表达
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Q556;Q786(酶)
大庆市科技局攻关项目SGG2007-031;大庆市高新区创新基金资助项目DQGX08YF036;校博士启动基金项目校启D2009-4
2010-11-30(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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