轮状病毒基因重配株LD9(G2型)Vero细胞适应株的选育及其生物学特性

摘要：

目的 探讨轮状病毒基因重配株LD9(G2型)在Vero细胞上的传代适应性,选育高滴度的适应株.方法 将3个轮状病毒基因重配株LD9克隆株(G2型)(LD9-1、LD9-2、LD9-3)在Vero细胞上分别以0.05、0.10、0.15和0.20 MOI传代,选育出1株Vero细胞适应株,并确定其最适MOI,然后在Vero细胞上连续传代15代,检测病毒滴度及基因组核酸带型,采用nest RT-PCR法扩增其VP7基因.取第8、10、13代适应株病毒,以0.10 MOI接种于Vero细胞,观察病毒的增殖动态.结果 选育出的LD9-2株以0.10 MOI接种Vero细胞可产生明显的细胞病变(CPE),病毒滴度随传代次数的增加先下降后升高,至4代时最低,9代后稳定于6.75 lgCCID50/ml左右;连续传代15次,病毒基因组核酸带型均与原始毒株一致,且均能扩增出502 bp的VP7基因.LD9-2株病毒增殖高峰期均出现在第7～8天,病毒滴度为6.00～7.00 lgCCID50/ml.结论 轮状病毒基因重配株LD9株(G2型)经Vero细胞适应性培养,获得了病毒表达量高且能稳定传代的疫苗候选株.

关键词：轮状病毒疫苗、基因重配株、Vero细胞、生物学特性

所属期刊栏目：23

分类号：R373.2;R392-33(医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学）)

在线出版日期：2010-10-25（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：857-860