日本血吸虫核酸疫苗质粒适宜宿主菌的筛选及其发酵条件的优化

摘要：

目的 筛选二价日本血吸虫核酸疫苗质粒的适宜宿主菌,并对其发酵条件进行优化.方法 通过综合考察细胞干重、质粒DNA产量及工程菌传代的质粒稳定性等参数,确定适宜宿主菌及其相适应的发酵培养基碳源、氮源和磷酸盐类型;进一步通过中心组合设计响应面试验,优化发酵培养基,并对优化的发酵培养基进行实验验证.结果 确定适宜宿主菌为E.coli DH5α,优化的发酵培养基(m/v)为:NaCl 1.0%,Yeast Extract 1.0%,磷酸盐0.3%[其中m(K2HPO4):m(KH2PO4)=1:4],甘油1.68%,牛肉汁2.28%,豆饼汁4.21%.在此发酵条件下,菌体干重由原来的1.57 mg/ml增长至5.68 mg/ml,质粒DNA产量由原来的3.94 μg/ml增长至36.52μg/ml.结论 已筛选出日本血吸虫核酸疫苗质粒适宜宿主菌,并优化了其发酵条件,明显提高了质粒DNA产量,具有大规模发酵生产应用价值.

关键词：血吸虫、日本、疫苗、DNA、质粒、发酵

所属期刊栏目：23

分类号：R383.2+4;R392-33(医学寄生虫学)

资助基金：教育部博士点基金20070487059;教育部新世纪优秀人才计划项目NCET-06-0646;863项目2004AA2Z3212

在线出版日期：2010-10-25（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：845-851