人溶菌酶-抗菌肽tachyplesins融合蛋白的原核表达及其抗菌活性

摘要：

目的 原核表达人溶菌酶(Human lysozyme,hLYZ)和抗菌肽tachyplesins融合蛋白,并检测其抗菌活性.方法 人工合成抗菌肽tachyplesins基因和linker,与pMD18-T-hLYZ上切下的hLYZ基因融合,将融合基因克隆至带有GST标签的原核表达载体pGEX4T-1上,转化大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导表达,并对表达条件进行优化.表达的融合蛋白经亲和层析纯化后,进行抗菌活性检测.结果 重组表达质粒pGEX4T-1hLYZ-tachyplesins经PCR、双酶切及测序鉴定,证明构建正确;表达产物经SDS-PAGE分析,在相对分子质量约44000处可见目的蛋白条带,诱导温度在25℃,IPTG终浓度为0.8 mmol/L,诱导时间为6 h,融合蛋白表达效果较好,主要以可溶性形式存在;纯化的融合蛋白纯度可达90%以上,对金黄葡萄球菌和大肠杆菌具有一定的抑制作用.结论 已成功在原核细胞中表达了人溶菌酶-抗菌肽tachyplesins融合蛋白,纯化的融合蛋白具有一定的抗菌活性.

关键词：溶菌酶、抗菌肽、Tachyplesins、重组融合蛋白质类、抗菌活性

所属期刊栏目：23

分类号：Q786(基因工程（遗传工程）)

资助基金：吉林省科技发展基金资助项目20070210

在线出版日期：2010-10-25（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：829-833