幽门螺杆菌双组分系统耐酸相关蛋白ArsS的原核表达及纯化

摘要：

目的 原核表达并纯化幽门螺杆菌双组分系统耐酸相关蛋白ArsS,为深入研究其功能及其在幽门螺杆菌耐酸机制中的作用奠定基础.方法 以幽门螺杆菌菌株26695基因组为模板,采用PCR法扩增ArsS基因,插入pET-22b(+)载体,构建重组原核表达质粒pET-22b(+)-ArsS,转化E.coli BL21(DE3),0.5 mmol/L IPTG 25℃诱导表达,并采用亲和层析与分子筛层析对重组蛋白进行纯化.结果 重组原核表达质粒pET-22b(+)-ArsS经双酶切及测序鉴定,证明构建正确;重组蛋白以可溶性形式表达,表达量占菌体总蛋白的30%以上;分子筛层析图谱显示,在150 mmol/L NaCl条件下,目的蛋白层析效果较好,纯化后的重组蛋白纯度可达95%以上,浓度约为10 mg/ml.结论 已成功原核表达并纯化获得了高纯度的ArsS蛋白.

关键词：幽门螺杆菌、耐酸、双组分系统、基因表达

所属期刊栏目：23

分类号：R378;Q78(医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学）)

在线出版日期：2010-10-25（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：813-815,820