大鼠骨髓间充质干细胞的体外分离培养与鉴定

摘要：

目的 建立大鼠骨髓间充质干细胞(Mesenchymal stem cells,MSCs)体外分离培养及鉴定的方法,为MSCs的系列研究奠定基础.方法 采用全骨髓直接贴壁筛选法分离培养MSCs并传代,倒置相差显微镜下观察细胞形态,以MTT法检测细胞增殖水平并绘制生长曲线.取第3代MSCs,流式细胞术检测细胞周期和细胞表型,应用成骨细胞诱导液和脂肪样细胞诱导液诱导MSCs定向分化,鉴定其分化能力.结果 全骨髓细胞培养5 d,镜下可见贴壁细胞增殖明显,细胞形态较均一,大部分呈梭形,7 d左右可传代,经2～3次传代后细胞呈单一梭形的成纤维样细胞,即MSCs;细胞生长曲线呈S形;经流式细胞仪检测,MSCs细胞76.01%处于G0/G.期,7.13%处于G2/M期,16.86%处于S期;MSCs表面不表达CD34;在特定诱导液作用下,MSCs可分别向成骨样细胞及脂肪样细胞分化.结论 已成功建立了分离培养及鉴定MSCs的方法,可用来评价体外培养的MSCs.

关键词：骨髓间充质干细胞、细胞分离、细胞培养、鉴定

所属期刊栏目：23

分类号：Q2-33;R331.2

资助基金：吉林省科技厅科研基金资助课题20080446

在线出版日期：2010-09-30（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：774-777