牛乳溶菌酶的原核表达及初步纯化

摘要：

目的 原核表达并初步纯化牛乳溶菌酶(Bos taurus lysozymel,LYZ1).方法 人工设计并合成LYZ1基因CDS序列,将其克隆至表达载体pET-32a,构建重组表达质粒pET-32a-LYZ1,转化大肠杆菌BL21(DE3),筛选阳性菌株,经IPTG诱导,初步纯化表达产物,并对其进行SDS-PAGE和Western blot分析.结果 所构建的重组表达质粒经PCR、双酶切及测序鉴定正确;SDS-PAGE分析显示,目的蛋白相对分子质量约为32 000,主要以包涵体形式存在,表达量约占菌体总蛋白的70%以上,切胶纯化后纯度达95%;Western blot分析显示,重组融合蛋白可与小鼠Anti-His Tag单抗特异结合.结论 已成功原核表达并初步纯化了LYZ1,为后续研究与应用奠定了基础.

关键词：胞壁脂酶、基因表达、原核细胞

所属期刊栏目：23

分类号：Q566;Q78(维生素)

在线出版日期：2010-09-30（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：724-726