Kozak序列对TIMP1基因在人乳腺癌细胞MCF-7中表达的影响

摘要：

目的 探讨Kozak序列对基质金属蛋白酶抑制剂1(TIMP1)基因在人乳腺癌细胞MCF-7中表达的影响.方法 构建pcDNA3.1-TIMP1和pcDNA3.1-TIMP1-K(含有Kozak序列)重组真核表达质粒,用Fugene HD转染试剂将重组表达质粒转染MCF-7细胞,采用荧光定量PCR和Western blot检测pcDNA3.1-TIMP1和pcDNA3.1-TIMP1-K在MCF-7细胞中表达的差异.结果 重组真核表达质粒经PCR、双酶切及测序鉴定,证明构建正确.质粒pcDNA3.1-TIMP1-K转染细胞比空白对照细胞TIMP1基因mRNA表达量高约0.95倍,蛋白表达量高0.43倍;而质粒pcDNA3.1-TIMP1转染细胞比空白对照细胞mRNA表达量高0.37倍,蛋白表达量高0.25倍.结论 质粒pcDNA3.1-TIMP1-K与pcDNA3.1-TIMP1在MCF-7细胞中mRNA和蛋白表达水平均存在差异,Kozak序列提高了TIMP1基因的表达.

关键词：Kozak序列、基质金属蛋白酶、基质金属蛋白酶抑制剂1、乳腺肿瘤、MCF-7细胞

所属期刊栏目：23

分类号：Q786;R737.9(基因工程（遗传工程）)

资助基金：国家重大基础研究计划资助项目2006CB910505;黑龙江省研究生创新科研项目YHSCX2009-131HLJ

在线出版日期：2010-09-30（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：687-691