弓形虫速殖子特异表达蛋白SAG1启动子的克隆及鉴定

摘要：

目的 克隆弓形虫速殖子特异表达蛋白SAG1的启动子序列,为弓形虫基因操作提供工具.方法 应用PCR方法 扩增弓形虫速殖子特异表达蛋白SAG1的5'非编码区、致密颗粒蛋白GRA2的3'编码区和红色荧光蛋白(RFP)基因,并构建重组质粒pMD/SAG-RFP-GRA,经电穿孔法将其转染弓形虫速殖子,倒置荧光显微镜观察RFP的表达.结果 重组质粒pMD/SAG-RFP-GRA经双酶切和测序证明构建正确,质粒转染弓形虫速殖子24 h,荧光显微镜下可观察到红色荧光,表明克隆的SAG1启动子具有转录活性.结论 已成功克隆了弓形虫速殖子特异表达蛋白SAG1的启动子序列,并能介导外源基因在弓形虫体内的表达.

关键词：弓形虫病、速殖子、启动区(遗传学)、克隆

所属期刊栏目：23

分类号：R382.5;Q789(医学寄生虫学)

资助基金：国家自然科学基金资助30972178

在线出版日期：2010-09-30（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：602-604