靶向肠道病毒71型VP1基因的siRNA表达质粒的构建

摘要：

目的 构建靶向肠道病毒71型(EV71)VP1基因的siRNA表达质粒,并进行鉴定.方法 构建靶向EV71 VP1基因的siRNA表达质粒pSVSi1、pSVSi2和pSVSi3;脂质体法转染A549细胞株,筛选阳性克隆,通过荧光定量PCR和Western blot,分别在mRNA水平和蛋白水平鉴定EV71 VP1基因的表达.结果 质粒pSVSi1、pSVSi2和pSVSi3经测序证明构建正确.pSVSi1对A549细胞VP1基因的抑制效果最好,在mRNA和蛋白水平上的抑制率分别为87%和89%,pSVSi2和pSVSi3在mRNA水平上的抑制率分别为60%和70%.结论 已成功构建了靶向EV71 VP1基因的siRNA表达质粒,并筛选出一种对VP1基因有显著抑制作用的siRNA,为手足口病的siRNA基因治疗奠定了基础.

关键词：肠道病毒A型、人、VP1基因、RNA干扰、RNA、小分子干扰

所属期刊栏目：23

分类号：R512.5(传染病)

资助基金：高等学校博士学科点专项科研基金20070631006

在线出版日期：2010-09-30（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：573-576