稳定表达绿色荧光蛋白标记的人单纯疱疹病毒2型潜伏相关转录体ORF2融合蛋白的Vero细胞株的建立

摘要：

目的 建立稳定表达绿色荧光蛋白(EGFP)标记的人单纯疱疹病毒2型(HSV-2)潜伏相关转录体(LAT)开放读码框2(ORF2)融合蛋白的Vero细胞株.方法 构建重组真核表达质粒pEGFP-ORF2,经酶切及测序鉴定正确后,体外转染Vero细胞,经G418筛选稳定表达融合蛋白的克隆,扩大培养后,荧光显微镜观察EGFP的表达,RT-PCR检测目的 基因的转录.结果 重组真核表达质粒pEGFP-ORF2经酶切及测序鉴定构建正确,经G418培养20 d筛选出的Vero细胞株荧光显微镜下可见融合蛋白表达,RT-PCR检测显示,转染了重组表达质粒的Vero细胞内有目的 基因的表达.结论 已成功建立了稳定表达EGFPORF2的Vero细胞株,为进一步研究HSV-2 LAT ORF2的功能奠定了基础.

关键词：疱疹病毒2型、人、潜伏相关转录体、开放读码框2、绿色荧光蛋白质类、Vero 细胞

所属期刊栏目：23

分类号：R373.1+1;Q786(医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学）)

资助基金：国家自然科学基金资助项目30972666;全军医药卫生科研基金资助项目06J008

在线出版日期：2010-09-30（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：566-568