悬浮Vero细胞快速扩增轮状病毒

摘要：

目的 探讨在悬浮Vero细胞中快速扩增轮状病毒(RV)的方法.方法 Vero细胞经消化后,直接接种KMG1 b7株RV.采用微量滴定法、PAGE和RT-PCR等方法比较悬浮扩增、静置培养及微载体发酵培养RV的感染性滴度、基因组核酸带型和型特异VP7基因序列;采用电镜观察和Western blot鉴定悬浮扩增RV的形态及结构蛋白的抗原性.结果 悬浮细胞扩增的RV接种24 h后病毒感染性滴度达峰值,为6.00 lgCCID50/ml;而静置培养和微载体发酵培养分别在接种后(96±24)h和(48±6)h达峰值,分别为(6.00±0.25)lgCCID50/ml和(6.50±0.25)lgCCID50/ml.悬浮扩增的RV基因组呈典型的4-2-3-2 G1血清型带型,G1型特异基因VP7序列未发生突变.悬浮扩增的RV形态和结构蛋白的抗原性未发生改变.结论 在悬浮Vero,细胞中扩增RV可以缩短病毒制备周期,提高病毒收获量,有利于RV疫苗的研制或生产.

关键词：轮状病毒、Vero细胞、悬浮、扩增

所属期刊栏目：23

分类号：R373.2(医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学）)

资助基金：国家高技术研究发展计划863计划2006AAY2A211

在线出版日期：2010-07-13（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：526-528,532