重组人骨形态发生蛋白-7工程菌的高密度发酵
目的 建立重组入骨形态发生蛋白-7(dIBMP.7)工程菌的高密度发酵工艺.方法 采用摇瓶及发酵罐培养T程菌B121/pBV221-rhBMP-17,观察不同培养基、乙酸浓度、pH值、诱导时间等对工程菌菌体生长及目的蛋白表达的影响.在优化的发酵条件下培养工程菌,当菌体A鲫值达100时,42~C升温诱导,并对表达产物进行纯化.结果 发酵培养基与LB培养基培养的_T程菌目的蛋白的表达量无明显差异;乙酸可明显抑制菌体生长及目的蛋白表达;最适于菌体生长和目的蛋白表达的pH值分别为6.8和7.6;最佳诱导时同为3 h.以优化的发酵条件培养的工程菌诱导3 h后,目的蛋白的表达量可达菌体总蛋白的34.9%,最终菌体A600值可达139.5;经纯化的目的蛋白纯度可达95%以上.结论 已初步建立了rhBMP-7工程菌的高密度发酵工艺.
骨形态发生蛋白-7、高密度发酵、指数补料
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Q920.6
国家高新技术发展计划项目8632003AA2Z3532
2010-07-13(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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