重组HIV-1DNA疫苗工程菌中试发酵工艺的优化

摘要：

目的 优化重组HIV-1 DNA疫苗工程菌的中试发酵工艺.方法 优化质粒转化条件,制备工程菌Jm109/pVAX1-MEGp24种子液,连续传30代,检测其遗传稳定性;优化培养基成分、补料基质、补料方式和培养时间,确定最佳发酵参数;并应用最佳发酵参数,于50 L发酵罐进行3批中试规模的发酵,考察在发酵培养过程中质粒的稳定性和超螺旋质粒的比例.结果 工程菌在连续传代30次后,质粒拷贝数基本保持稳定;最佳发酵参数为:采用以甘油为碳源的培养基,以梯度恒速流加方式补料,培养时间13 h;通过3批稳定发酵.最终可获得湿菌67.0～68.6 g/L,质粒含量可达1.62～1.73 mg/g菌,超螺旋质粒的比例达93%以上.结论 已建立了稳定的重组HIV-1 DNA疫苗工程菌中试发酵工艺,为进一步规模化生产奠定了基础.

关键词：HIV-1、DNA疫苗、工程菌、发酵

所属期刊栏目：23

分类号：R373.9;R392-33(医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学）)

资助基金：国家高技术研究发展计划资助项目"863"项目2006AA02Z447

在线出版日期：2010-07-13（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：500-502,506