绿脓杆菌外毒素A功能片段重组蛋白GP38质控方法和质量标准的建立

摘要：

目的 建立人性腺激素释放激素类似物-绿脓杆菌外毒素A功能片段重组蛋白GP38的质控方法和质量标准.方法 采用HeLa细胞/结晶紫比色法测定GP38蛋白的生物学活性,并进行精密性和回收率验证;反相高效液相色潜法(RP-HPLC)测定其纯度,用自编CPM软件进行肽图比较分析;其他检测项目按<中国药典>三部(2005版)规定进行.结果 GP38蛋白生物学活性测定方法经验证,原液试验内变异系数(CV)为10%,试验间CV值为20%;成品试验内CV值为12%,试验间CV值为21%.用该法对GP38蛋白原液和成品进行检测,其生物学活性分别为(3 736±483)和(1 777±260)U/ml.原液经RP-HPLC分析,纯度为(97.1±0.2)%,符合其质量标准大于95.0%的规定.用自编CPM软件分析肽图结果显示,相同酶切条件重复检测的相似度大于0.99,不相同次酶切、相同条件重复检测的相似度大于0.90.其他各项检测结果均符合<中国药典>三部(2005版)的相关要求.结论 所建立的质控方法和质量标准可用于GP38蛋白产品的常规检定.

关键词：绿脓杆菌外毒素A、功能片段、质量控制、质量标准

所属期刊栏目：23

分类号：R378;R392-33(医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学）)

在线出版日期：2010-06-28（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：399-402