猪干扰素α基因的克隆与真核表达
目的 克隆猪干扰素α(IFNα)基因,并在毕赤酵母中进行表达.方法 用植物血凝素诱导猪外周血中的淋巴细胞,Trizol试剂提取总RNA,经RT-PCR扩增猪IFNα基因,将其克隆至pPIC9K载体中,构建重组真核表达质粒pPIC9K-IFNα,经PCR、酶切及测序鉴定正确后,电转化至毕赤酵母GS115中.筛选阳性菌株,经甲醇诱导表达后,进行SDS-PAGE及Western blot分析.结果 RT-PCR扩增获得521bp的猪IFNα基因;所构建的重组表达质粒经PCR、酶切及测序鉴定正确;表达的目的蛋白相对分子质量约为19 000,可溶性蛋白约占菌体总蛋白的13%;该蛋白能与相应抗体产生特异免疫反应.结论 已成功克隆并在毕赤酵母中表达了猪IFNα基因,为进一步研究其生物学性状奠定了基础.
猪IFNα基因、克隆、真核表达、毕赤酵母
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Q78(基因工程（遗传工程）)
辽宁省博士启动资金项目20081099;辽宁医学院博士启动资金项目
2010-06-28（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
369-372
