小鼠白细胞介素-13受体α2胞外区的原核表达与纯化
目的 原核表达并纯化小鼠白细胞介素-13受体α2胞外区(sIL-13Rα2).方法 将sIL-13Rα2基因克隆入原核表达载体pROEX HTa,构建重组表达质粒pROEX HTa/sIL-13Rα2,经双酶切鉴定后,转化大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导表达.薄层扫描分析目的蛋白的表达量,并对其进行表达形式分析及Western blot鉴定.镍柱亲和层析纯化目的蛋白.结果 重组表达质粒经双酶切鉴定证明构建正确.表达的sIL-13Rα2蛋白相对分子质量约为36 200;诱导6 h,重组蛋白的表达量最高,约占菌体总蛋白的45%;重组蛋白以包涵体形式存在,可与大鼠抗小鼠sIL-13Rv2单克隆抗体发生特异性反应;纯化后纯度大于95%.结论 已成功表达并纯化了sIL-13Rα2,为进一步探讨其治疗支气管哮喘奠定了基础.
小鼠白细胞介素-13受体α2胞外区、原核表达、纯化
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Q78(基因工程(遗传工程))
国家自然科学基金30770926
2010-06-28(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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