慢性粒细胞白血病Bcr/Ab1基因OD域融合蛋白的原核表达及纯化
目的 原核表达并纯化慢性粒细胞白血病(CML)Bcr/Ab1基因OD域融合蛋白.方法 将TAT、OD和HA基因片段顺次克隆入pET32a(+)原核表达载体,构建重组原核表达质粒pTAT-OD-HA,经PCR、双酶切和测序鉴定正确的重组质粒转化E.coli BL21(DE3),IPTG诱导表达,表达产物经SDS-PAGE及Western blot分析后,用镍离子亲和层析柱纯化.结果 所构建的重组质粒pTAT-OD-HA经PCR、双酶切及测序鉴定正确;表达的重组蛋白相对分子质量约为30 000,诱导6 h蛋白表达量达最高,约为10%;Western blot分析显示,该蛋白可与鼠抗HA单克隆抗体发生特异性反应;纯化后纯度约为95%.结论 已成功原核表达并纯化了TAT-OD-HA融合蛋白,为进一步研究其在CML中的作用奠定了基础.
慢性粒细胞白血病、Bcr/Ab1基因、OD域、原核表达、纯化
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R733(肿瘤学)
国家自然科学基金30670901
2010-06-28（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
354-357
