H5N1高致病性人禽流感DNA疫苗表达质粒的构建及其免疫原性
目的 构建H5N1高致病性人禽流感DNA疫苗表达质粒,并观察其免疫原性.方法 分析H5N1人禽流感病毒HA基因的进化关系,人工合成人禽流感病毒HA基因(包含多数H5N1人禽流感病毒共有序列),构建含细胞毒性T淋巴细胞抗原4(CTLA4)和HA融合基因的真核表达质粒pVAX-CLHA及HA基因的真核表达质粒pVAX-HA,经酶切及测序鉴定正确后,转染293-T细胞,经RT-PCR法检测转染细胞中HA基因mRNA的转录水平,间接免疫荧光法(IFA)检测其表达;分别以质粒pVAX-CLHA及pVAX-HA免疫BALB/c小鼠,测定血清HI抗体效价.结果 重组DNA疫苗表达质粒pVAX-CLHA和pVAX-HA经酶切及测序证明构建正确,转染的293-T细胞可检测到目的基因的转录及蛋白的表达;3次免疫后均能诱导BALB/c小鼠产生HI抗体,pVAX-CLHA诱导的HI抗体高于pVAX-HA.结论 已成功构建了含H5N1 HA及CTLA4融合基因的DNA疫苗表达质粒,其对小鼠具有良好的免疫效果,为H5N1高致病性人禽流感DNA疫苗的开发奠定了基础.
高致病性人禽流感病毒、H5N1亚型、DNA疫苗、免疫原性
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R373.1~+3;Q78(医学微生物学(病原细菌学、病原微生物学))
2010-05-24(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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