结核分枝杆菌早期分泌性蛋白ESAT-6的原核表达及纯化

摘要：

目的 原核表达并纯化结核分枝杆菌早期分泌性蛋白ESAT-6.方法 将ESAT-6基因自pET-24b-ESAT-6质粒亚克隆至pGEX-3C载体中,构建重组表达质粒pGEX-ESAT-6,经酶切及测序鉴定正确后,分别转化大肠杆菌JM107和BL21(DE3),以不同浓度IPTG诱导表达,表达产物经GSH-Sepharose 4B亲和层析纯化.结果 所构建的重组表达质粒pGEX-ESAT-6经酶切及测序鉴定正确;重组融合蛋白在大肠杆菌JM107中的表达量较高,可达菌体总蛋白的24.2%;最适IPTG诱导浓度为0.1 mmol/L;纯化的目的蛋白纯度可达83.9%.结论 已成功构建了重组表达质粒pGEX-ESAT-6,并在大肠杆菌JM107中高效表达,为结核分枝杆菌亚单位疫苗及核酸疫苗的研制提供了材料.

关键词：结核分枝杆菌、ESAT-6蛋白、原核表达、纯化

所属期刊栏目：23

分类号：Q75;R378.91~+1(分子遗传学)

在线出版日期：2010-05-24（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共3页

页码：267-269