金黄葡萄球菌肠毒素C3基因的克隆及原核表达

摘要：

目的 克隆并原核表达金黄葡萄球菌肠毒素C3(SEC3)基因.方法 以金黄葡萄球菌基因组DNA为模板,扩增SEC3基因中编码成熟蛋白的基因片段,克隆至pET-32a(+)表达载体,构建重组表达质粒SEC3-pET-32a,转化E.coli BL21(DE3),IPTG诱导表达.表达产物经Ni-NTA亲和层析纯化后,进行SDS-PAGE和Western blot分析.结果 经PCR扩增获得720 bp的SEC3基因;重组表达质粒构建正确;表达产物的相对分子质量约为43 000,为可溶性表达;纯化的重组蛋白具有良好的反应原性.结论 已成功克隆并原核表达了SEC3基因,为单克隆抗体和诊断试剂的制备及SEC3抗毒素的研制提供了材料.

关键词：金黄葡萄球菌、肠毒素C3、克隆、原核表达

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分类号：R378.1~+1;QTS(医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学）)

资助基金：湖南省自然科学基金06JJ4051

在线出版日期：2010-05-24（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：256-260