恶性疟原虫膜蛋白Pf332-DBL区在毕赤酵母中的表达
目的 在毕赤酵母中表达恶性疟原虫膜蛋白Pt332-DBL区.方法 采用PCR技术,扩增Pf332-DBL区基因序列,并插入到pPICZαA载体EcoR Ⅰ和Xba Ⅰ位点间,电转化至毕赤酵母X-33中,筛选阳性重组酵母,甲醇诱导表达,并通过亲和层析纯化重组蛋白,Western blot进行鉴定.结果 获得1株阳性重组酵母;表达的重组蛋白相对分子质量约33 000,诱导72 h,目的蛋白的表达量最高,占上清蛋白总量的85%;纯化的重组蛋白浓度为800 μg/ml,与抗His标签的鼠源单抗和抗Pf332-DBL单抗均可发生特异性反应.结论 已成功地在毕赤酵母中表达了恶性疟原虫膜蛋白Pt332-DBL区,为下一步利用该蛋白进行亚单位疫苗的研制及其功能研究奠定了基础.
恶性疟原虫、Pf332、真核表达、毕赤酵母
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R382.3~+1;Q786(医学寄生虫学)
国家重点基础科技发展计划973项目2007CB513101
2010-05-24(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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