D2蛋白酶间接ELISA检测方法的建立

摘要：

目的 建立D2蛋白酶间接ELISA检测方法,为D2蛋白酶的进一步研究及应用奠定基础.方法 以纯化的D2蛋白酶为抗原,免疫新西兰白兔,制备D2蛋白酶多克隆抗体,建立D2蛋白酶间接ELISA检测方法,并进行验证及初步应用.结果 D2蛋白酶间接ELISA检测方法的最佳反应条件为:一抗稀释度为1:64 000,二抗稀释度为1:80 000,抗原稀释度为1:100,饱和包被浓度为1 160 ng/ml,封闭剂为10%胎牛血清.标准曲线的线性检测范围为18～1 160 ng/ml.该方法准确性、重复性良好,特异性强、敏感性高,与琼脂扩散试验检测结果的符合率为95.5%.结论 已建立了D2蛋白酶间接ELISA检测方法,可用于D2蛋白酶含量的检测.

关键词：D2蛋白酶、间接ELISA、多克隆抗体

所属期刊栏目：23

分类号：Q55;R392-33(酶)

资助基金：国家'973'计划重大基础研究前期研究专项2004-CCA02400;泰山学者工程资助

在线出版日期：2010-04-13（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：207-210