呼吸道合胞病毒空斑检测方法的建立及应用
目的 建立呼吸道合胞病毒(RSV)空斑检测方法,并用于病毒滴度的定量.方法 将不同稀释度的RSV A2株病毒液分别接种于Hep-2细胞单层,加0.6%营养琼脂糖覆盖,培养6 d后用10%甲醛固定.去除覆盖层,0.05%中性红染色,按文献报道的方法进行空斑计数.建立空斑法测定RSV滴度的标准曲线,并验证空斑法的准确性及精密性,应用建立的空斑法检测RSV感染BALB/c小鼠肺组织中的RSV滴度.结果 RSV A2株感染的Hep-2细胞出现典型的空斑,直径约1~3 mm,形态呈圆形或类圆形.空斑法的最低检测限为3.4×10~1PFU/ml,线性关系良好,相关系数r=0.999 996,准确性及精密性均良好.RSV感染的BALB/c小鼠肺组织标本均出现数量不等的空斑.结论 所建立的RSV空斑测定方法敏感、准确,能稳定地对病毒滴度进行定量测定,为进一步研究RSV的感染性和免疫原性奠定了基础.
呼吸道合胞病毒、空斑试验、病毒滴度
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R373.9;R563.9;R392-33(医学微生物学(病原细菌学、病原微生物学))
2010-04-13(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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