猪血清白蛋白基因的克隆及其在毕赤酵母中的分泌表达
目的 克隆猪血清白蛋白(PSA)基因,并在毕赤酵母中分泌表达.方法 Trizol法提取新鲜猪肝组织总RNA,经RT-PCR扩增PSA全长cDNA,克隆至酵母分泌型表达载体pPICZaC,构建重组表达质粒pPICZaC-PSA,电转化至毕赤酵母X33,甲醇诱导表达,表达产物进行SDS-PAGE和Western blot分析.结果 重组表达质粒pPICZaC-PSA经双酶切及测序鉴定正确,表达的重组蛋白经SDS-PAGE分析,在相对分子质量约69 500处可见特异条带,表达量为菌体总蛋白的29.5%,紫外吸收法测定蛋白含量为0.06 mg/ml,并可与PSA多抗发生特异性反应.结论 已成功克隆了PSA基因,并在毕赤酵母中获得表达.
猪血清白蛋白、克隆、毕赤酵母、分泌表达
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QTS;QT86
广东省动物防疫检疫研究专项经费粤财农[2007]479号
2010-04-13(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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