乙型脑炎病毒SA14-14-2株NS1和E蛋白的原核表达及其免疫原性
目的 原核表达乙型脑炎病毒(JEV)NS1和E蛋白,并初步探讨其免疫原性.方法 采用RT-PCR法扩增JEVSA14-14-2株NS1和E蛋白基因片段,分别克隆入原核表达载体pET-30a(+)和pET-32a(+),构建重组表达质粒pET-30NS1和pET-32Et,转化大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导表达,SDS-PAGE分析目的蛋白的表达形式及表达水平.两种蛋白经亲和层析纯化后,Western blot鉴定其反应原性.通过小鼠主动和被动保护力试验及豚鼠病毒血症试验,检测两种蛋白的免疫原性.结果 酶切及测序证明重组表达质粒构建正确;表达的重组NS1和E蛋白的相对分子质量分别约为40 000和47 000,均以包涵体形式表达;纯化的重组NS1和E蛋白的浓度分别为160.7和380μg/ml,均具有良好的反应原性;小鼠主动和被动保护力试验表明两种蛋白均有保护活性;豚鼠病毒血症试验显示,NS1蛋白免疫豚鼠后能明显抑制病毒血症的产生.结论 已成功表达并纯化了JEV SA14-14-2株NS1和E蛋白,两种蛋白均有较好的免疫保护活性.
乙型脑炎病毒、SA14-14-2株、NS1蛋白、E蛋白、原核表达、免疫原性
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R373.3~+1;Q786(医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学）)
2010-04-13（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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