牛布氏杆菌特异性抗体间接ELISA检测方法的建立及应用

摘要：

目的 建立牛布氏杆菌特异性抗体间接ELISA检测方法 ,并进行初步应用.方法 用大肠杆菌表达的牛布氏杆菌重组BP26蛋白作为检测抗原,用棋盘滴定法确定包被抗原和待检血清的最佳工作浓度,对各种反应条件进行优化,建立间接ELISA方法 ,并进行验证.采用建立的间接ELISA方法 与传统的试管凝集试验同时检测116份血清样品,评价二者的符合率.结果 间接ELISA的最佳反应条件为:抗原包被量5 μg/孔;待检血清稀释倍数1:200.作用时间60 min;酶标二抗作用时间60 min;封闭液为5%BSA,作用时间45 min.S/P值≥0.363者判为阳性,S/P值≤0.291者判为阴性,介二两者之间判为可疑.该方法 精密性良好,特异性较强.敏感性较高,与传统的试管凝集试验检测结果 的符合率为93.3%.结论 已成功建立了检测牛布氏杆菌特异性抗体的间接ELISA方法 .为布氏杆菌病的流行病学调查提供了一种简便的血清学诊断方法.

关键词：牛布氏杆菌、重组BP26蛋白、间接ELISA

所属期刊栏目：22

分类号：R378.5;R392-33(医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学）)

资助基金：吉林省省长基金20076013

在线出版日期：2010-03-19（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：1244-1246,1250