兽用灭活纯化狂犬病疫苗生产工艺的优化

摘要：

目的 优化兽用灭活纯化狂犬病疫苗的生产工艺.方法 建立BHK21 C13细胞主细胞库、工作细胞库,狂犬病病毒疫苗株LEP-Flury主种子批、工作种子批,并进行鉴定.优化悬浮培养工艺参数,并分析病毒原液浓缩、纯化和灭活过程中抗原及成品的稳定性.结果 主细胞库、工作细胞库无外源因子污染,细胞形态、生长良好;狂犬病病毒主种子批和工作种子批无外源因子污染,病毒滴度最高可达107.8 logLD50/ml.采用15 L生物反应器,在优化的培养工艺条件下,细胞密度可达4.5×106个/ml,病毒按0.3 MOI接种,灌流培养5次,病毒滴度平均可达106.8 logLD50/ml.病毒原液合并后,经750 KD中空纤维柱30倍浓缩,Sepharose Fast Flow 6层析柱纯化,1/4 000 β-丙内酯灭活,期间加入稳定剂,纯化疫苗效价平均达(5.03±1.84)IU/头份,纯化的抗原量达(11.75±0.70)μg/头份,在4℃可保存24个月,在37℃可保存30 d,在45℃可保存12 h.结论 优化的兽用灭活狂犬病疫苗的生产工艺可提高疫苗的安全性、有效性及稳定性.

关键词：兽用狂犬病疫苗、生物反应器、生产工艺、稳定性

所属期刊栏目：22

分类号：R94;Q813(药剂学)

在线出版日期：2009-11-20（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：882-886