植物乳杆菌中胆盐水解酶基因的原核表达及纯化

摘要：

目的 克隆植物乳杆菌中胆盐水解酶(BSH)基因,原核表达并纯化重组蛋白.方法 利用PCR技术扩增植物乳杆菌BSH基因,克隆至表达载体pET-30a,转化大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导表达,并对表达产物进行纯化及Western blot鉴定.结果 重组表达质粒pET-30a-BSH经双酶切鉴定,可见961 bp的目的 基因条带.表达的重组蛋白相对分子质量约为40 000(含6个His标签),主要以包涵体形式表达,表达量约占菌体总蛋白的43%,纯化后,纯度达90%以上,且可与植物乳杆菌多克隆抗血清发生特异性反应.结论 已成功克隆了植物乳杆菌中BSH基因,并在大肠杆菌中获得高效表达.纯化的重组蛋白纯度较高,为高效降解胆固醇的基因工程菌株的研究奠定了基础.

关键词：植物乳杆菌、胆盐水解酶、原核表达、纯化

所属期刊栏目：22

分类号：Q786(基因工程（遗传工程）)

资助基金：大庆市科技局攻关项目SGG2007-031;大庆市高新区创新基金DQGX08YF036;黑龙江省研究生创新科研资金项目YJSCX2008-066HLJ

在线出版日期：2009-11-20（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：876-879