鼠细小病毒感染性滴度测定方法的建立及病毒制备

摘要：

目的 建立鼠细小病毒(MMV)感染性滴度测定方法,并制备高滴度的MMV,为生物制品病毒清除/灭活工艺的验证奠定基础.方法 通过分析NB324K细胞接种量、培养时间及病毒吸附时间等参数,建立MMV病毒滴度测定的半数细胞感染剂量法(CCID50),并分析其精密性;以A9细胞制备MMV,分析感染复数(MOI)、收获时间及收获样本对病毒滴度的影响,并检测病毒的稳定性.结果 NB324K细胞的最佳接种浓度、培养时间及病毒吸附时间分别为5×103个/孔、48 h及2 h,所建立的检测方法精密性较好;A9细胞沉淀中病毒滴度高于上清,且随病毒MOI值的升高而逐渐增加,在MOI为10时,感染后48 h收获,病毒滴度最高.制备的病毒液的平均滴度为8.69 CCID50/ml,4℃和37℃保存7 d及反复冻融5次,稳定性良好.结论 已建立了MMV感染性滴度测定方法,并制备了高滴度的病毒,为以MMV为指示病毒进行病毒清除/灭活工艺验证奠定了基础.

关键词：鼠细小病毒、感染性滴度、NB324K细胞、A9细胞、半数细胞感染剂量、感染复数

所属期刊栏目：22

分类号：R392.1

资助基金：国家科技摹础条件平台建设-实验细胞资源的整理整合与共享项目2005DKA21502

在线出版日期：2009-10-19（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：815-818