抗黄曲霉毒素B1重链IgG2b亚型单克隆抗体的制备及应用

摘要：

目的 制备抗黄曲霉毒素B1(AFB1)的重链IgG2b亚型单克隆抗体,并建立黄曲霉毒素B1的间接竞争ELISA检测方法.方法 采用AFB1-BSA偶联物为免疫抗原,AFBI-STI偶联物为检测抗原,利用间接竞争ELISA筛选分泌抗AFB1单抗的细胞株,并对抗体进行鉴定.结果 筛选到1株能分泌特异性抗AFB1单克隆抗体的杂交瘤细胞株,其染色体数目为(90±10)条;所分泌的单抗亚类重链为IgG2b,轻链为λ;间接ELISA检测该株杂交瘤细胞分泌上清效价在1:12 800～1:25 600,纯化腹水效价为1:105～1:106.传30代及液氮中保存6个月,抗体效价稳定;建立的间接竞争ELISA检测方法的最低检出限为0.001 ng/ml,校正曲线的线性范围为0.005～5 ng/ml,IC50为0.01 ng/ml;与AFB1的结构类似物AFM1和化学结构有差异的脱氧雪腐镰刀菌烯醇的交叉反应率分别为1.4%和<1%.结论 所制备的抗黄曲霉毒素B1单克隆抗体具有高度特异性和稳定性,可应用于间接竞争ELISA检测方法.

关键词：黄曲霉毒素B1、重链IgG2b亚型、单克隆抗体、酶联免疫试验

所属期刊栏目：22

分类号：R446.61(诊断学)

资助基金：国家自然科学基金30771799;黑龙江省教育厅项目1151hz025;中国博士后科学基金20070410882

在线出版日期：2009-07-15（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共3页

页码：602-604