人IL-23R胞内区基因的克隆与原核表达

摘要：

目的 克隆人IL-23R(hIL-23R)胞内区基因,并在大肠杆菌中表达融合蛋白.方法 通过PCR获得hlL-23R基因的胞内区片段,克隆至载体pGEX-4T-1中,构建重组原核表达质粒pGEX-4T-1-hIL-23R(I),转化感受态大肠杆菌B121(DE3),IPTG诱导表达,表达产物经SDS-PAGE及Western blot进行鉴定.结果 hIL-23R胞内区基因的PCR扩增产物经琼脂糖凝胶电泳分析可见约760 bp的目的片段.重组原核表达质粒经双酶切及测序证明构建正确.表达的融合蛋白相对分子质量约为55 000,在低温(20℃)、低IPTG浓度(0.5 mmol/L)诱导条件下能以可溶形式表达,可溶性蛋白的表达量约占菌体可溶件蛋白总量的16.1%,且可被兔抗GST多克隆抗体识别.结论 已成功克隆了hlL-23R胞内区基因,并在大肠杆菌中表达了可溶性的GsT融合蛋白.

关键词：人IL-23受体、胞内区、基因克隆、原核表达

所属期刊栏目：22

分类号：QTSS;Q786

资助基金：国家自然科学基金30671944

在线出版日期：2009-07-15（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：571-573,582