人颗粒溶素活性肽和小鼠单链白细胞介素-12重组卡介苗的构建及鉴定

摘要：

目的 构建含人颗粒溶素(GLS)活性肽和小鼠单链白细胞介素-12(mIL-12)基因的重组卡介苗(BCG),并鉴定其向真核细胞递呈质粒的能力.方法 以分子生物学方法构建含相对分子质量为9 000的颗粒溶素活性肽基因和小鼠IL-12基因及分枝杆菌复制子OriM的真核穿梭共表达质粒pBM9,以电转化的方式将pBM9质粒转入BCG,构建重组BCG,抽提质粒进行PCR鉴定;将重组菌感染小鼠巨噬细胞RAW264.7,经RT-PCR检测重组菌向真核细胞递呈质粒的能力.结果 重组BCG可扩增出与GKS基因和mIL-12基因相符的目的条带.重组BCG感染RAW264.7细胞96 h后,经RT-PCR可扩增出267 bp的GLS基因条带和1 632 bp的mIL-12基因条带.结论 已成功构建含GLS和mlL-12基因的重组BCG,该重组BCG能向小鼠巨噬细胞递呈携带的目的基因.

关键词：颗粒溶素、白细胞介素-12、重组卡介苗、真核表达

所属期刊栏目：22

分类号：R3;Q781

资助基金：国家自然科学基金304000375

在线出版日期：2009-07-15（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：556-559