应用AdMax系统构建携带HCV核心基因Core的重组腺病毒载体

摘要：

目的 应用AdMax系统构建携带丙型肝炎病毒(HCV)核心基因core的重组腺病毒载体,为进一步研究防止HCV感染的基因疫苗和基因治疗奠定基础.方法 RT-PCR法从丙型肝炎患者血清中扩增HCV Core基因,连接到腺病毒穿梭质粒的多克隆位点上,构建重组穿梭质粒pDC315-Core,在脂质体介导下与腺病毒辅助大质粒pBHGlox(delta)E1,3Cre共转染HEK293细胞,包装产生复制缺陷型重组腺病毒pAd-Core,经HEK293细胞扩增后,离子交换柱层析法纯化病毒,测定病毒颗粒数及滴度,并计算比活性及单细胞产量.结果 重组腺病毒pad-Core感染的HEK293细胞经PCR检测,可扩增出HCV核心基因Core片段,经测序证明,其插入序列与设计的HCV Core基因序列一致.扩增纯化后,重组腺病毒的比活性达0.034 IU/VP,单细胞产量可达2.63×104VP/细胞.结论 已成功构建重组腺病毒载体pAd-Core,为Core基因在腺病毒介导下的基因免疫和基因治疗的研究奠定了基础.

关键词：丙型肝炎病毒、Core基因、重组腺病毒

所属期刊栏目：22

分类号：Q781;Q784(基因工程（遗传工程）)

在线出版日期：2009-07-15（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：552-555