四价重组A群链球菌多肽疫苗基因序列的合成及克隆
目的 设计针对可引起风湿热的A群链球菌M1、3、6、18四个血清型的重组多肽疫苗,合成并克隆该重组多肽疫苗的核苷酸序列.方法 从美国疾病预防和控制中心(CDC)数据库获得A群链球菌1、3、6、18四个血清型M蛋白型特异性序列,根据文献报道并结合生物信息学的方法,筛选每一个血清型的特异性序列中与人体组织蛋白无同源性的区段,将其按1-3-6-18型的顺序串连,在串联序列的C-端加上一个四个血清型所共有的与人体组织蛋白无交叉表位、且具有一定免疫原性的保守序列J14.对设计的多肽疫苗的氨基酸序列进行与人体组织蛋白的BlastP比对、亲水性分析、二级结构分析、空间结构分析以及B细胞表位预测.采用DNAWORK 2.0在线软件设计一组寡核苷酸引物,Overlap PCR方法合成该多肽疫苗的核苷酸序列,并在5'端和3'端分别引入BamH Ⅰ和Hind Ⅲ的酶切位点,将该序列双酶切后克隆至pUC18载体上,并测序.结果 软件分析显示,设计的多肽疫苗与人体组织蛋白无同源性,有较好的亲水性,二级结构与空间结构均与天然M蛋白相似,在每一个血清型的区段都可能存在B细胞表位.成功扩增出了该多肽疫苗的DNA序列,并获得了一个与设计序列完全一致的重组克隆载体.结论 已成功设计了一种四价重组A群链球菌多肽疫苗,为其重组表达和免疫原性的研究奠定了基础.
A群链球菌、多肽疫苗、基因序列、合成、克隆
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Q781;Q785(基因工程（遗传工程）)
2009-06-19（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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474-479
